PGD
Τι είναι η PGD;
Ο γενετικός έλεγχος είναι πολύ σημαντικός για την αύξηση της επιτυχίας της θεραπείας εξωσωματικής γονιμοποίησης και τη μεγιστοποίηση της πιθανότητας μιας υγιούς εγκυμοσύνης. Αυτές οι εξετάσεις που πραγματοποιούνται στο εργαστήριό μας παρέχουν έγκαιρη ανίχνευση πιθανών γενετικών διαταραχών με την ολοκληρωμένη ανάλυση της γενετικής δομής των εμβρύων. Με τον τρόπο αυτό, καθιστούμε δυνατή τη μεταφορά υγιών εμβρύων και αυξάνουμε σημαντικά τις πιθανότητες να αποκτήσουν οι οικογένειες υγιή μωρά. Εκτός από τη διασφάλιση ότι οι μέλλοντες γονείς θα αποκτήσουν υγιή μωρά, πραγματοποιούμε επίσης επιλογή φύλου για σκοπούς γενετικού ελέγχου.
Οι γενετικές αναλύσεις πριν από την εγκυμοσύνη των εμβρύων που αναπτύσσονται μέσω της θεραπείας εξωσωματικής γονιμοποίησης είναι πλέον δυνατές και πραγματοποιούνται ευρέως. Αυτή η διαγνωστική μέθοδος, η οποία χρησιμοποιείται για να διαπιστωθεί εάν το έμβρυο φέρει κάποια χρωμοσωμική διαταραχή ή γενετική ασθένεια ενώ βρίσκεται ακόμη στο στάδιο του εμβρύου, επιτρέπει τη δημιουργία υγιών γενεών. Η PGD είναι επίσης κατάλληλη μέθοδος για υποψήφιους γονείς με γενετικές αλλαγές που προκαλούν καρκινικά σύνδρομα.
Ένας άλλος σκοπός της ΠΓΔ είναι ο εντοπισμός πιθανών γενετικών ελαττωμάτων στα έμβρυα των μελλοντικών γονέων που θα υποβληθούν σε θεραπεία εξωσωματικής γονιμοποίησης λόγω υπογονιμότητας (δηλ. στειρότητας).
Η διαδικασία αυτή προσφέρει στα ζευγάρια την ευκαιρία μιας υγιούς εγκυμοσύνης και συμβάλλει στην πρόληψη της μετάδοσης ορισμένων γενετικών ασθενειών από γενιά σε γενιά.
Πώς πραγματοποιείται η PGD;
Ξεκινά με τον συνδυασμό των ωαρίων και των σπερματοζωαρίων που λαμβάνονται κατά τη θεραπεία εξωσωματικής γονιμοποίησης σε εργαστηριακό περιβάλλον και τη μετατροπή τους σε έμβρυα και τη λήψη βιοψιών από αυτά τα έμβρυα. Η βιοψία πραγματοποιείται την 3η ή 5η ημέρα των εμβρύων και τα κύτταρα αυτά αποστέλλονται στο εργαστήριο για γενετική ανάλυση.
Η διαδικασία αυτή δεν βλάπτει το υπόλοιπο έμβρυο και δεν επηρεάζει τη φυσιολογική ανάπτυξη του εμβρύου. Διερευνώνται δομικές και αριθμητικές χρωμοσωμικές διαταραχές και ασθένειες ενός γονιδίου (όπως η SMA, η κυστική ίνωση, η μεσογειακή αναιμία, η δρεπανοκυτταρική αναιμία). Με αυτόν τον τρόπο, υγιή έμβρυα μεταφέρονται στη μέλλουσα μητέρα και γεννιούνται υγιή μωρά.
Σε ποιους διενεργείται PGD;
– Όντας φορέας μιας γενετικής νόσου
– Έχοντας γενετική ασθένεια
– Έχοντας παιδί με γενετική ασθένεια
– Τυποποίηση HLA σε ασθένειες όπως η μεσογειακή αναιμία, η λευχαιμία κ.λπ.
– Έχοντας ασθένειες όπως ο καρκίνος κ.λπ.
– Να είναι μεγαλύτερης ηλικίας μέλλουσα μητέρα (37 ετών και άνω)
– Επαναλαμβανόμενες απώλειες εγκυμοσύνης
– Αποτυχημένες προσπάθειες εξωσωματικής γονιμοποίησης
– Σοβαρή ανδρική υπογονιμότητα
– Ανεξήγητη υπογονιμότητα (στειρότητα)
– Εξωσωματική γονιμοποίηση με προσδιορισμό φύλου
Ασθένειες που μπορούν να εντοπιστούν με PGD
Χρωμοσωμικές ασθένειες
1.Αριθμητικά χρωμοσωμικά νοσήματα
Σύνδρομο Turner Σύνδρομο μονοσωμίας Χ
Σύνδρομο Down Το χρωμόσωμα 21 έχει 3 αντίγραφα αντί για 2 αντίγραφα
Σύνδρομο Klinefelter: Τα άτομα με χρωμόσωμα 47,XXY έχουν 1 επιπλέον χρωμόσωμα Χ.
Σύνδρομο Edwards (Τρισωμία 18)
Σύνδρομο Patau (τρισωμία 13)
Εφαρμόζονται FISH και NGS και η μέθοδος PGT-A
2.Δομικά χρωμοσωμικά νοσήματα
1) Μετατοπίσεις: Δομικές χρωμοσωμικές ανωμαλίες που προκύπτουν από την ανταλλαγή τμημάτων μεταξύ χρωμοσωμάτων.
Αμοιβαία μετατόπιση: Είναι η αμοιβαία ανταλλαγή τμημάτων από δύο διαφορετικά μη ομόλογα χρωμοσώματα μεταξύ χρωμοσωμάτων.
Robertsonian Translocation: Συμβαίνει όταν ένα χρωμόσωμα συνδέεται πλήρως με ένα άλλο χρωμόσωμα. Είναι ο πιο κοινός τύπος μετατόπισης.
2) Αναστροφή: Συμβαίνει όταν συμβαίνει ένα σπάσιμο σε δύο διαφορετικά σημεία ενός χρωμοσώματος και το τμήμα μεταξύ των σπασιμάτων περιστρέφεται κατά 180 μοίρες.
3) Διαγραφές: Ως διαγραφή ορίζεται η απώλεια οποιασδήποτε περιοχής ενός χρωμοσώματος.
Εφαρμόζονται οι μέθοδοι FISH και PGT-SR
3.Ασθένειες ενός γονιδίου
Απαιτούνται πιο προηγμένες συσκευές και διαφορετικές τεχνικές για τον εντοπισμό ασθενειών ενός γονιδίου στο στάδιο του εμβρύου. Επειδή είναι πιο δύσκολο να εντοπιστούν από ό,τι οι χρωμοσωμικές ασθένειες, η πιο σημαντική προϋπόθεση για τη διαδικασία PGD-M είναι ότι η αλλαγή του DNA που προκαλεί τη νόσο, δηλαδή η μετάλλαξη, πρέπει να ανιχνευθεί εκ των προτέρων.
Οι ασθένειες του DNA μπορούν να εξεταστούν στο στάδιο του εμβρύου με τη σημερινή τεχνολογία και συνήθως απαιτούνται 1-2 μήνες εργασιών εγκατάστασης για την προκαταρκτική προετοιμασία.
Κατά τη διάρκεια αυτής της προκαταρκτικής προετοιμασίας, η διαδικασία PGT-M εξειδικεύεται για τη μετάλλαξη στην περιοχή του γονιδίου που προκαλεί την ασθένεια. Επιπλέον, κατά τη φάση της προκαταρκτικής προετοιμασίας προσδιορίζονται πληροφοριακοί δείκτες που αφορούν την οικογένεια. Με τον τρόπο αυτό, μειώνεται ο κίνδυνος λανθασμένης διάγνωσης λόγω των εξετάσεων που διενεργούνται σε ένα μόνο κύτταρο στο στάδιο του εμβρύου.
Τι είναι η εξέταση ανάλυσης χρωμοσωμάτων (καρυότυπος);
Η εξέταση καρυότυπου είναι μια εξέταση που επιτρέπει την εξέταση των χρωμοσωμάτων ως προς τον αριθμό, το σχήμα και το μέγεθος. Αναλύεται στο περιφερικό αίμα. Υπάρχουν 46 χρωμοσώματα στο κύτταρο ενός φυσιολογικού ατόμου. Ο αριθμός των χρωμοσωμάτων των σπερματοζωαρίων και των ωαρίων, τα οποία έχουν διαφορετικό αριθμό χρωμοσωμάτων στο ανθρώπινο σώμα, είναι 23. Τα κύτταρα αυτά γονιμοποιούνται και συντήκονται σε ένα έμβρυο με 46 χρωμοσώματα. Εάν ο αριθμός των χρωμοσωμάτων είναι μεγαλύτερος ή μικρότερος από 46 ή εάν υπάρχουν διαφορές στο σχήμα και το μέγεθος, αναπτύσσονται χρωμοσωμικές ασθένειες.
Μέθοδοι PGD
Μέθοδοι προεμφυτευτικού γενετικού ελέγχου
1.Ngs (αλληλούχιση νέας γενιάς)
Σήμερα, η πιο προηγμένη μέθοδος γενετικής διάγνωσης είναι η NGS, γνωστή και ως αλληλούχιση νέας γενιάς. Αυτή η ολοκληρωμένη σάρωση χρωμοσωμάτων, η οποία ελέγχει περίπου 20.000 γονίδια στα έμβρυα, σαρώνει και τα 23 ζεύγη χρωμοσωμάτων, συμπεριλαμβανομένων των χρωμοσωμάτων φύλου.
Με τη μέθοδο NGS, τα γενετικά προβλήματα σε επίπεδο χρωμοσωμάτων ελέγχονται γρήγορα και αποτελεσματικά πριν από την εγκυμοσύνη. Πρόκειται για μια από τις πιο προηγμένες μεθόδους της σημερινής τεχνολογίας και παρόλο που είναι πιο ακριβή, προτιμάται ιδιαίτερα από τις οικογένειες.
Η διαδικασία εξωσωματικής γονιμοποίησης με τη μέθοδο NGS δεν διαφέρει από την κανονική διαδικασία εξωσωματικής γονιμοποίησης. Τα έμβρυα καταψύχονται ένα προς ένα την 5η ημέρα της διαδικασίας βιοψίας. Σε αυτή τη μέθοδο, η οποία δίνει αποτελέσματα σε περίπου 3-4 εβδομάδες, η εμβρυομεταφορά αφήνεται για τους επόμενους μήνες.
2.Μέθοδος Fish (μέθοδος φθορισμού με επιτόπια ενυδάτωση):
Είναι η πιο πρακτική, ταχύτερη και λιγότερο δαπανηρή μέθοδος PGD. Τα κύτταρα εξετάζονται στο μικροσκόπιο φθορισμού με χρώση του πυρήνα των κυττάρων χρησιμοποιώντας ειδικά κιτ στο γενετικό εργαστήριο και χρησιμοποιούνται για τον προσδιορισμό κοινών ανωμαλιών όπως 13, 15, 16, 17, 18, 21, 22, χρωμοσώματα Χ -Υ.
Η μέθοδος FISH, η οποία αναλύει συνολικά 9 χρωμοσώματα, χρησιμοποιείται από τη δεκαετία του 1990 και παρόλο που είναι πολύ ισχυρή, η περιοχή κάλυψής της είναι στενότερη από άλλες μεθόδους. Ως εκ τούτου, χρησιμοποιείται γενικά για την επιλογή φύλου.
Acgh (Array Comperative Genomic Hybridisation) – Συγκριτικός γονιδιωματικός υβριδισμός με βάση μικροσυστοιχίες
Η aCGH είναι η καλύτερη εξέταση γενετικού ελέγχου στην οποία αναλύονται 46 χρωμοσώματα. Η μέθοδος αυτή είναι κατάλληλη για μέλλουσες μητέρες που εμφανίζουν επαναλαμβανόμενη αποτυχία εξωσωματικής γονιμοποίησης ή επαναλαμβανόμενη απώλεια εγκυμοσύνης. Είναι γρήγορη στον έλεγχο για γενετικές διαταραχές και είναι εξαιρετικά αξιόπιστη με μικρότερο ποσοστό σφάλματος και προτιμάται περισσότερο στον έλεγχο για την τρέχουσα ασθένεια επειδή στοχεύει σε ένα συγκεκριμένο σύνολο DNA. Ειδικά σε άτομα με γενετικές ανωμαλίες, η aCGH έχει αποδειχθεί ότι είναι μια ισχυρή μέθοδος για την ανίχνευση χρωμοσωμικών ανωμαλιών που δεν είναι ορατές στο μικροσκόπιο. Επιπλέον, το 10-20% των χρωμοσωμικών ανωμαλιών σε παιδιά με αναπτυξιακές διαταραχές και νοητική αναπηρία μπορεί να ανιχνευθεί με την aCGH.
Ωστόσο, δεδομένου ότι απαιτούνται προκαταρκτικές πληροφορίες, δεν μπορεί να προσδιοριστεί τίποτα από όσα δεν αναζητούνται άμεσα. Ως εκ τούτου, δεν αποτελεί κατάλληλη μέθοδο για την επιλογή φύλου.
Η διαδικασία εξωσωματικής γονιμοποίησης με τη μέθοδο aCGH είναι σαν μια κανονική διαδικασία εξωσωματικής γονιμοποίησης. Η βιοψία εμβρύων πραγματοποιείται την 5η ημέρα των εμβρύων και τα έμβρυα καταψύχονται ένα προς ένα. Τα κύτταρα που λαμβάνονται αποστέλλονται στο γενετικό εργαστήριο. Ως αποτέλεσμα των εξετάσεων που γίνονται από τους ειδικούς γενετιστές, το αποτέλεσμα καθορίζεται σε περίπου 3-4 εβδομάδες και η εμβρυομεταφορά αφήνεται για τους επόμενους μήνες.
4.Μέθοδος PCR (αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης):
Με τη μέθοδο αυτή ελέγχονται συνήθως ασθένειες ενός γονιδίου, όπως η μεσογειακή αναιμία (μεσογειακή αναιμία) και η αιμορροφιλία. Τα κύτταρα που λαμβάνονται από τα έμβρυα με βιοψία αποστέλλονται στο γενετικό εργαστήριο. Εκεί, τα κύτταρα αναλύονται για να διαπιστωθεί εάν τα έμβρυα προσβάλλονται από την ασθένεια μετά από διπλασιασμό γονιδιακής περιοχής και προσδιορισμό γονιδιακής αλληλουχίας.
Η μέθοδος αυτή προτιμάται όταν πρόκειται να γίνει επιλογή φύλου σε ασθενείς με γονιδιακές ασθένειες στις οποίες έχουν ήδη εντοπιστεί μεταλλάξεις. Το κόστος είναι ελαφρώς υψηλότερο από τη μέθοδο FISH.
Η διαδικασία εξωσωματικής γονιμοποίησης με τη μέθοδο PCR είναι και πάλι όπως μια κανονική διαδικασία εξωσωματικής γονιμοποίησης. Τα έμβρυα υποβάλλονται σε βιοψία την 3η ημέρα των εμβρύων και τα κύτταρα που λαμβάνονται αποστέλλονται στο γενετικό εργαστήριο. Ως αποτέλεσμα των εξετάσεων που γίνονται από τους ειδικούς γενετιστές, το αποτέλεσμα προσδιορίζεται εντός 24-36 ωρών και η μεταφορά προγραμματίζεται την 5η ημέρα ανάλογα με το αποτέλεσμα.
Βιοψία 5ου τροφικού μορίου (βιοψία βλαστοκύστης 5ης ημέρας)
Πρόκειται για ένα είδος μεθόδου ταχείας γενετικού προσδιορισμού. Τα κύτταρα που λαμβάνονται με τη μέθοδο της βιοψίας την 5η ημέρα των εμβρύων υποβάλλονται σε ταχεία γενετική εξέταση και τα αποτελέσματα λαμβάνονται εντός δύο ωρών. Είναι δυνατόν η μεταφορά να πραγματοποιηθεί την ίδια ημέρα και η διαδικασία της εξωσωματικής γονιμοποίησης να είναι σαν μια κανονική διαδικασία θεραπείας εξωσωματικής γονιμοποίησης.
